湖北GISH-武漢貝科新肽科技公司
武漢貝科新肽科技有限公司
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原位雜交技術(shù)的原理是什么?有何用途
原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列,將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測DNA或RNA互補(bǔ)配對,結(jié)合成專一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個(gè)重要條件:組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物(曾呈奎等2000)。

FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實(shí)驗(yàn)室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域?;驹硎菬晒鈽?biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進(jìn)行分析。DNA熒光標(biāo)記探針是其中常用的一類核酸探針。利用此探針可對組織、細(xì)胞或染色體中的DNA進(jìn)行染色體及基因水平 的分析。熒光標(biāo)記探針不對環(huán)境構(gòu)成污染,靈敏度能得到保障,可進(jìn)行多色觀察分析,因而可同時(shí)使用多個(gè)探針,縮 短因單個(gè)探針分開使用導(dǎo)致的周期過程和技術(shù)障礙。

植物原位雜交除了在遺傳育種方面的應(yīng)用,還在其他領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,包括:
植物基因表達(dá)模式研究:通過植物原位雜交技術(shù)可以檢測特定基因在不同組織或不同生長條件下的表達(dá)模式,有助于了解基因的功能和作用機(jī)制。
植物基因組研究:植物原位雜交技術(shù)可以用于基因組研究,例如染色體構(gòu)象、基因組變異和基因組進(jìn)化等方面,有助于深入了解植物基因組的特征和結(jié)構(gòu)。